化妆品中甲醛的检测方法
发布日期:2020-06-10
国家药品监督管理局新增的《化妆品中游离甲醛的检测方法》(2015版)中对甲醛的含量标准及检测做了详细的指导与规定,自2020年1月1日起,化妆品注册、备案及监督检验相关检测均需按照发布的检测方法进行。奥豪斯根据国家修订的标准与实施细则,通过与实践结合,为大家总结了化妆品中甲醛的检测方法。
美国食品药品管理局(FDA)调查结果显示,化妆品中使用甲醛的比例高达25%。4瓶化妆品有1瓶含有甲醛。
虽然化妆品和日常卫生用品中的甲醛常常可以经皮肤与人体接触,但很难进入到体内,对机体的作用局限于接触部位和其紧密接触的细胞层。但是,当接触的量超出正常代谢容量时,甲醛可进入到血液中,可能会对肾、肝和造血等组织发挥毒性作用,引起多个系统的损害。
因此,中国对化妆品等其他产品中甲醛的最大使用含量有严格的标准。以化妆品为例,甲醛和多聚甲醛在化妆品中的最大允许使用含量为0.2%(以游离甲醛计),并规定禁用于喷雾化妆品。
国家药品监督管理局新增的《化妆品中游离甲醛的检测方法》(2015版)中对甲醛的含量标准及检测做了详细的指导与规定,自2020年1月1日起,化妆品注册、备案及监督检验相关检测均需按照发布的检测方法进行。
虽然化妆品和日常卫生用品中的甲醛常常可以经皮肤与人体接触,但很难进入到体内,对机体的作用局限于接触部位和其紧密接触的细胞层。但是,当接触的量超出正常代谢容量时,甲醛可进入到血液中,可能会对肾、肝和造血等组织发挥毒性作用,引起多个系统的损害。
因此,中国对化妆品等其他产品中甲醛的最大使用含量有严格的标准。以化妆品为例,甲醛和多聚甲醛在化妆品中的最大允许使用含量为0.2%(以游离甲醛计),并规定禁用于喷雾化妆品。
国家药品监督管理局新增的《化妆品中游离甲醛的检测方法》(2015版)中对甲醛的含量标准及检测做了详细的指导与规定,自2020年1月1日起,化妆品注册、备案及监督检验相关检测均需按照发布的检测方法进行。
奥豪斯根据国家修订的标准与实施细则,通过与实践结合,为大家总结了化妆品中甲醛的检测方法。
1 范围
本方法规定了采用柱前衍生化液相色谱-紫外检测法测定化妆品中甲醛(CAS :50-00-0)的方法。
本方法适用于化妆品中甲醛含量的测定。
本方法规定了采用柱前衍生化液相色谱-紫外检测法测定化妆品中甲醛(CAS :50-00-0)的方法。
本方法适用于化妆品中甲醛含量的测定。
2 方法提要
甲醛测定采用柱前衍生化法,甲醛与2,4-二硝基苯肼反应生成黄色的2,4-二硝基苯腙(见图1),经高效液相色谱分离,紫外检测器在355 nm波长下检测,根据保留时间定性,峰面积定量,以标准曲线法计算含量。本方法对甲醛的检出限为0.01 µg,定量下限为0.052 µg。取0.2 g样品时,本方法对甲醛的检出浓度为0.001%,最低定量浓度为0.0052%。
3 试剂 除另有规定外,所用试剂均为分析纯,水为实验室用一级水。
3.1 甲醛标准物质水溶液。
3.2 2,4-二硝基苯肼,纯度 ≥ 99.0%。 3.3 三氯甲烷,色谱纯,含量 ≥ 99.9%。
3.4 盐酸(20 =1.19 g/mL)。
3.5 氢氧化钠。
3.6 磷酸氢二钠(Na2HPO4•12H2O)。
3.7 磷酸二氢钠(NaH2PO4•2H2O)。
3.8 乙腈,色谱纯。
3.9 甲醇,色谱纯。
3.10 去离子水。
3.11 2,4-二硝基苯肼盐酸溶液:称取2,4-二硝基苯肼(3.2) 0.20 g,置于锥形瓶中,先加浓盐酸(3.4)40 mL使溶解,必要时可超声助溶,再加去离子水(3.10)60 mL,摇匀,即得。
3.12 氢氧化钠溶液[c(NaOH)= 1 mol/L]:称取NaOH(3.5)10 g,加水适量溶解后,转移到250 mL量瓶中,用去离子水(3.10)稀释并定容至刻度,摇匀,即得。
3.13 磷酸缓冲溶液。精密称定NaH2PO4•2H2O(3.7)2.28 g和Na2HPO4•12H2O(3.6)12.67 g,加水适量溶解后,转移到100 mL量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,即得。
3.14 乙腈水溶液(9+1):量取乙腈(3.8)180 mL,置锥形瓶中,加水20 mL,摇匀,即得。
3.15甲醛系列标准溶液:精密量取适量甲醛标准物质水溶液(3.1)置于10 mL量瓶中,加乙腈水溶液(3.14)稀释至刻度,摇匀,得质量浓度约为1.04mg/mL 的甲醛储备液,然后按照表1 进行标准溶液的配置。
甲醛测定采用柱前衍生化法,甲醛与2,4-二硝基苯肼反应生成黄色的2,4-二硝基苯腙(见图1),经高效液相色谱分离,紫外检测器在355 nm波长下检测,根据保留时间定性,峰面积定量,以标准曲线法计算含量。本方法对甲醛的检出限为0.01 µg,定量下限为0.052 µg。取0.2 g样品时,本方法对甲醛的检出浓度为0.001%,最低定量浓度为0.0052%。
图1 甲醛衍生化反应式
3 试剂
3.1 甲醛标准物质水溶液。
3.2 2,4-二硝基苯肼,纯度 ≥ 99.0%。 3.3 三氯甲烷,色谱纯,含量 ≥ 99.9%。
3.4 盐酸(20 =1.19 g/mL)。
3.5 氢氧化钠。
3.6 磷酸氢二钠(Na2HPO4•12H2O)。
3.7 磷酸二氢钠(NaH2PO4•2H2O)。
3.8 乙腈,色谱纯。
3.9 甲醇,色谱纯。
3.10 去离子水。
3.11 2,4-二硝基苯肼盐酸溶液:称取2,4-二硝基苯肼(3.2) 0.20 g,置于锥形瓶中,先加浓盐酸(3.4)40 mL使溶解,必要时可超声助溶,再加去离子水(3.10)60 mL,摇匀,即得。
3.12 氢氧化钠溶液[c(NaOH)= 1 mol/L]:称取NaOH(3.5)10 g,加水适量溶解后,转移到250 mL量瓶中,用去离子水(3.10)稀释并定容至刻度,摇匀,即得。
3.13 磷酸缓冲溶液。精密称定NaH2PO4•2H2O(3.7)2.28 g和Na2HPO4•12H2O(3.6)12.67 g,加水适量溶解后,转移到100 mL量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,即得。
3.14 乙腈水溶液(9+1):量取乙腈(3.8)180 mL,置锥形瓶中,加水20 mL,摇匀,即得。
3.15甲醛系列标准溶液:精密量取适量甲醛标准物质水溶液(3.1)置于10 mL量瓶中,加乙腈水溶液(3.14)稀释至刻度,摇匀,得质量浓度约为1.04mg/mL 的甲醛储备液,然后按照表1 进行标准溶液的配置。
4 仪器
4.1 高效液相色谱仪:具有紫外检测器。
4.2 分析天平:感量0.01mg。
4.3 超声波清洗仪。
4.4 离心机。
4.5 精密吸量管或精密移液器。
4.6 涡旋振荡器。
4.1 高效液相色谱仪:具有紫外检测器。
4.2 分析天平:感量0.01mg。
4.3 超声波清洗仪。
4.4 离心机。
4.5 精密吸量管或精密移液器。
4.6 涡旋振荡器。
5 分析步骤
5.1 样品预处理
称取化妆品样品0.20 g(精确至0.001 g),置具塞刻度管中,加乙腈水溶液(3.14)至2 mL,涡旋2 min,使混匀,以5000 rpm转速离心5 min,精密量取上清液1 mL置5 mL 离心管中,加水2 mL,涡旋30 s,必要时以5000 rpm转速离心5 min,精密量取上清液1 mL置10 mL离心管中,加2,4-二硝基苯肼盐酸溶液(3.11)0.4 mL,涡旋1 min,静置2 min,加磷酸缓冲液(3.13)0.4 mL,再加氢氧化钠溶液(3.12)约1.9 mL调至中性,涡旋10 s,然后加入4 mL 三氯甲烷(3.3),涡旋3 min,以5000 rpm转速离心10 min,取三氯甲烷层溶液1 mL置离心管中,以5000 rpm转速离心10 min,取三氯甲烷层溶液,作为色谱分析待测液,备用。
5.1 样品预处理
称取化妆品样品0.20 g(精确至0.001 g),置具塞刻度管中,加乙腈水溶液(3.14)至2 mL,涡旋2 min,使混匀,以5000 rpm转速离心5 min,精密量取上清液1 mL置5 mL 离心管中,加水2 mL,涡旋30 s,必要时以5000 rpm转速离心5 min,精密量取上清液1 mL置10 mL离心管中,加2,4-二硝基苯肼盐酸溶液(3.11)0.4 mL,涡旋1 min,静置2 min,加磷酸缓冲液(3.13)0.4 mL,再加氢氧化钠溶液(3.12)约1.9 mL调至中性,涡旋10 s,然后加入4 mL 三氯甲烷(3.3),涡旋3 min,以5000 rpm转速离心10 min,取三氯甲烷层溶液1 mL置离心管中,以5000 rpm转速离心10 min,取三氯甲烷层溶液,作为色谱分析待测液,备用。
5.2 色谱柱参考条件
有人说“选择一种合适的样本前处理方法,就等于完成了分析工作的一半”,这恰如其分地道出了样品前处理的重要性。
该检测方法样品前处理中,分析天平可选用Ohaus Pioneer® PX系列分析天平。该系列天平由于其超高性能比,平易近人的价格,杰出的性能,在各个领域受到很多客户的欢迎。1:显示屏双行显示,第二行可显示天平中文操作提示,用户无需参照说明书即可操作天平;2:称量室上方自带红色ESR静电消除条,独特的除静电设计,确保天平称量准确;3:天平配备的标准USB和RS232接口,数据通讯更便捷。
高质量的离心机也是此次检测项目的必备。用于将悬浮液中的固体颗粒与液体分开,或将乳浊液中两种密度不同,又互不相溶的液体分开。是样品前处理的重要的实验步骤。OHAUS 提供的高质量离心机有各种转子,满足各类样品的离心分离,灵活性极高。因此,研究人员能作出可重复的结果,并不用担心机器的磨损。
奥豪斯迷你涡旋振荡器4种型号,满足从低速到高速的应用需求,让样品混合更高效可控。模拟型号可调整振荡速度,数显型号可更精准控速并实现定时,从而获得可重复的结果。脉冲型号配有独特的脉冲振荡动作、减少产热,同时可提高混合效率、满足细胞破碎的需求。定速型号专为重复振荡应用而设计,简单按压杯头即开启高速混合。