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马尔文 MicroCal VP-Capillary DSC 系统专门用于通过差示扫描量热法(DSC)筛选多种样品的热跃迁中点(Tm)和其它热力学参数。 整个过程利用自动进样器、控制软件和分析软件实现自动化。
溶液中的生物分子在其自然(折叠)构象和变性(去折叠)构象之间保持平衡。 测得的热跃迁中点(Tm)可提供快速、简易的稳定性指示。 Tm值越大,生物分子越稳定。
测量原理
由蛋白质和其他大分子形成的清晰结构经历温度诱导的构象变化,如去折叠。 这些变化造成非共价键重新分配, 从而导致热吸收。 差示扫描量热仪测量这种热量的吸收。
MicroCal VP-Capillary DSC的热核心包括参比池和样品池,均封装在一个绝缘夹套中。 该装置设计成始终保持两池处于相同温度。 测量过程中,参比池和样品池同时以恒定的扫描速率加热。 样品分子去折叠时,吸收热量,在样品池和参比池间形成温差(ΔT)。 这就形成了整个帕帖尔单元内的热梯度,建立起成比例的电压,然后转化成动力形成一个到加热器的反馈回路,将DT(温差)恢复至0。
例如,由于蛋白质去折叠是一个吸热事件,在信号中观察是一个正位移(热容)。 该“溶解”跃迁的中点为Tm,曲线下的面积就是该过程的焓(ΔH)。
DSC是一种用于表征蛋白质和其他生物分子稳定性的强大分析工具, 测量溶液中热诱导结构跃迁的焓(ΔH)和温度(Tm)。 该信息让我们能够深入了解使蛋白质、核酸、胶束复合体和其他大分子系统稳定或失去稳定性的影响因素。 数据用来预测货架期、制定纯化策略、表征和评价蛋白质构建体或其他生物治疗性实体,并用来在小分子药物发现项目中对配体到蛋白质靶的亲和力进行排名。
高通量、高灵敏度的MicroCal VP-Capillary DSC系统的特点是:其软件可通过简化的实验设置和灵活的仪器调度来简化工作流程。 自动化的数据分析和改进的数据分类功能有助于舒缓分析瓶颈,将典型实验的数据分析时间由数日减少为几个小时。
- 获业界认同的稳定性指示技术需要最少的分析开发过程,快速确定最佳稳定性条件。
- 无标签研究处于自然状态的分子,实现溶液中生物分子稳定性的直接测量。
- 通过恒温控制, 可储存6个标准的96-孔板,确保了大容量和上样方便性。
- 完全一体化的自动进样器支持每天处理多达50个样品。
- 自动装填、进样和池清洗功能支持一周七天、一天24小时无人值守运行。
- 强大的软件让典型实验的数据分析时间由数日减少为几个小时。
- 130 µL的有效池容量以及仅0.2 mg/mL的典型浓度要求,允许对稀缺或珍贵的样品进行热力学测量。
- 可用于与光学方法发生干扰的溶液,包括浑浊、有色或颗粒状样品。
- 非反应性钽61池具有出色的耐化学性,可确保与蛋白质和其他生物分子配合时的惰性。
- 固定在原位的池仅需低程度维护,具有可再生的超灵敏度性能。
- 配套的毛细管池可提供快速扫描和快速温度平衡。
- 通过智能用户界面控制,VPViewer™利用支持MicroCal的Origin®软件自动进行数据分析。
- 全套系统包括ThermoVac样品制备和清洗装置,无需其它附件、试剂或耗材。
- Tm 飘移配体结合筛选。