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Viscosizer TD 的独特之处在于,可在微毛细管流动相中使用泰勒分散分析和紫外成像,以实现溶液中目标生物分子的超低容量生物物理学表征。
泰勒分散分析是一种本质上非常简单的实验方法,可将一纳升样本脉冲注入匹配缓冲液的一个层流。 通过紫外线吸收情况进行时间浓度曲线(或泰勒图)分析,可确定分子分散系数,从而确定溶质分子的流体力学半径。
Viscosizer TD 使用全自动方法分析小分子、多肽和蛋白质以及混有这些物质的样品的稳定性,甚至可以用于存在赋形剂和表面活性剂(在其他分析方法中可导致测量干扰)的情况。
微毛细管流测量方法还可以使用泊肃叶流定律在相同样品中补充进行相对粘度测量。
- Viscosizer TD 是一款易于使用的系统,可在温度控制自动进样器中进行样本储存和展示,以确保样本完整性
- 灵活直观的软件界面可提供全自动的检测计划和数据分析,以实现无人值守式的操作
- 40 纳升样品量即可进行分子粒度测量,6 微升样品量即可进行相对粘度分析
- 共需 35 微升样品量,以便分成一式三份,用于对同一份样品测量分子粒度和相对粘度(可回收量超过 15 微升)
- 测量分子粒度的紫外检测可在浓度低至微克的条件下实现测量
- 采用独特双通计时功能的相对粘度测量可在低浓度和低粘度的情况下实现高分辨率测量和高重现性
- 泰勒分散分析可实现无与伦比的溶液中分子粒度测量范围,从小分子、多肽和蛋白质粒度至混有这些物质的样品
- 用于测定蛋白质稳定性和蛋白质溶解度的正交试验技术所涉猎的研究范围从候选物质验证至早期配方开发不等
- 为生物制药研究人员提供新技术,以评估多肽稳定性和多肽溶解度
- 可更改紫外波长,以优化测量灵敏度和分子选择性
- 使用匹配的样品缓冲液有效渲染看不见的赋形剂和表面活性剂,可在复合溶液中对目标生物分子进行无需标签的表征
- 不会因为存在少量团聚体而对测量造成负面影响,这意味着,运行样本前所需的样品制备过程极少,无需稀释或过滤
Viscosizer TD 是一款生物物理学表征工具,可为研究人员提供独一无二的测量性能,帮助其评估复合溶液中目标生物分子的结构稳定性、自缔合作用及溶解度。 关键应用领域包括:
- 使用超低样品量和低蛋白质浓度,在开发线上针对 mAbs 的可开发性进行早期筛选
- 在配方开发过程中优化复合缓冲液中的主要候选物质
- 评估生物治疗药物的关键质量因素 (CQA)
- 在低浓度下开展多肽治疗药物的生物物理学研究
- 推进了解药物在接近体内条件下的作用
工作原理:
Malvern Viscosizer TD 是一款基于微毛细管流的自动化系统,具有紫外检测功能,可实现溶液中的分子粒度测量和相对粘度测量。 该仪器包含三个主要组件
- 自动进样器装置 – 提供温度控制样品瓶(及缓冲液、洗脱液和废液瓶)储存功能,可自动将样品/缓冲液/洗脱液输送至微毛细管
- 探测头 – 作为单独的温度控制附件整合至自动进样器装置,内有紫外成像传感器和可进行内部更换的毛细管组件(带有两个检测窗口)
- 控制盒 – 内有氙灯、可进行内部更换的紫外波长滤波器以及电极,可处理系统通信、数据捕获和传输
两种实验方法使用相同的微毛细管设置,用于确定溶液中分子的流体力学半径或溶液的相对粘度。 自动粒度和粘度分析可在相同样品上运行,包括重复测量。
流体力学半径 – 泰勒分散分析
- 选择紫外波长滤波器检测样品中吸收紫外光的发色团
- 设置样品测量温度
- 使用自动程序清洁微毛细管并填充匹配的样品缓冲液
- 将若干纳升的样品脉冲注入缓冲液
- 样品脉冲在维持不变的驱动压力下流经毛细管,并在泰勒分散的作用下分散
- 样品脉冲的紫外吸收曲线(或泰勒图)可在两个固定窗口中显示
- 泰勒图自动数据分析可确定分子分散系数 (D) 和流体力学半径 (Rh)
- 使用自动程序清洁微毛细管,用于重复测量
相对粘度 – 泊肃叶流定律
- 设置样品测量温度
- 使用自动程序清洁微毛细管并使用空气进行净化
- 在维持不变的驱动压力下将若干微升的样品段注入毛细管
- 沿毛细管在两个固定窗口检测样品段边缘(只需根据折射率变化)并测量其在两个窗口之间的时间 (Δts)
- 然后通过粘度已知的溶液或缓冲液(如水)在窗口之间移动的所需时间推算出样品时间 (Δtr),以计算样品粘度
- 使用自动程序清洁微毛细管,用于重复测量